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分析不同类型的荧光定量PCR仪各有什么特点

作者:荧光定量PCR仪   发布时间:2020-05-20

    虽然PCR基因扩增仪的生产厂家、型号有很多,工作原理不尽相同,使用方法也不尽一致,但都具有向自动化和智能化发展的趋势,这对于使用者来说比较方便,只要参考说明书轻轻触动键钮,输入或改变扩增程序、反应时间、温度等,置入扩增样品,PCR基因扩增仪就会自动完成整个扩增过程。

    温度控制是决定PCR反应能否成功的关键,主要包括温度的准确性、均一性以及升降温速度。对梯度基因扩增仪来说,还必须考虑JS-G基因扩增仪在梯度模式和标准模式下是否具有同样的温度特性。实时荧光定量JS-G基因扩增仪均有荧光检测系统,主要包括激发光源和检测器。简便的人性化设计zui能满足其需求。多样化样品基座设计、热盖等都使基因扩增仪越来越人性化。
    不同类型的荧光定量pcr仪

    荧光定量pcr仪为您分析不同的类型的仪器各有什么不同的特点:

    1、金属板式实时定量基因扩增仪,还可作为普通PCR仪使用,有的甚至带梯度功能,可容纳的样本量大,无需特殊耗材,但温度均一性欠佳,有边缘效应,标准曲线的反应条件难以做到与样品完全一致。

    2、离心式实时定量基因扩增仪的PCR扩增样品槽被设计为离心转子,温度均一性好,但可容纳样品量少,有的需用特殊毛细管作样品管,增加了使用成本,也不带梯度功能。

    3、各孔独立控温的定量基因扩增仪的不同样品槽分别拥有独立的智能升降温模块,各孔独立控温,适合多指标快速检测,可实现任意梯度反应,但上样不如传统方法方便,而且需要独特的扁平反应管,使用成本较高。

    PCR基因扩增仪适用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应为特征的、以检测DNA/RNA为目的的各种病原体检测及基因分析。

    根据DNA扩增的目的和检测的标准,JS-G基因扩增仪分为普通基因扩增仪,梯度基因扩增仪,原位基因扩增仪,实时荧光定量基因扩增仪四类。
    下面我们就来看下他们具体的特色:

    1、普通的JS-G基因扩增仪:把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,叫传统的PCR仪,也叫普通PCR仪。如果要做不同的退火温度需要多次运行。主要是做简单的,对目的基因退火温度的扩增。该仪器主要应用于科研研究,教学,医学临床,检验检疫等机构。

    2、梯度JS-G基因扩增仪:把一次性pcr扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(温度梯度),通常12种温度梯度,这样的仪器就叫梯度PCR仪。因为被扩增的不同DNA片段,其zui适退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增,就可以筛选出表达量高的zui适退火温度,进行有效的扩增。

    3、原位JS-G基因扩增仪:用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪,如病源基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。是保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位置上进行基因扩增,不但可以检测到靶DNA,又能标出靶序列在细胞内的位置,于分子和细胞水平上研究疾病的发病机理和临床过程及病理的转变有重大的实用价值。

    4、实时荧光定量PCR基因扩增仪:在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,就成了荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。把这PCR仪叫做实时荧光定量PCR仪。

    PCR仪维护注意事项:

    1、注意本机的使用环境条件和电源;

    2、机盖开关要轻,以防损坏盖锁;

    3、严禁工作时打开机盖;

    4、定期用中性肥皂水清洗样品槽,严禁使用强碱、有机溶液和高浓度酒精擦洗;

    5、有故障时请有专业知识的维修人员或厂家技术人员维修。

    什么是实时荧光定量PCR?

    这是一种可以实时监控核酸扩增的技术,在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化对PCR过程进行实时监控,以此实现对初始模板的定量分析,可简称为qPCR或real-time PCR,但绝非RT-PCR,这是逆转录PCR的意思。

    相较于常规PCR,借助电泳对扩增反应的终产物进行半定量及定性分析,qPCR利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,最终精确的对起始模板定量分析。

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