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荧光定量PCR仪检测新型冠状病毒步骤

作者:荧光定量PCR仪   发布时间:2020-05-08

    荧光定量PCR仪是目前开展对新型冠状病毒核酸检测的必备仪器,该仪器与检测试剂盒配套可以快速高效检测病人样本是否被新型冠状病毒感染,是目前病毒确诊的使用最广泛的手段

    我国主要的几种检测试剂盒都是基于RT-PCR原理。因为需要检测的病毒样本浓度有高有低,高的容易检测,低浓度就会漏掉。所以PCR的方法就把病毒基因扩增很多倍,达到可以检测出来的浓度。基本操作如下:

    1.收集咽拭子等病毒样本,通过试剂打碎保护病毒的蛋白质壳子,萃取病毒RNA。一方面是萃取,另一反面,打碎之后就没有了感染性,相对安全一些。

    2.由于这次新冠肺炎是单链RNA病毒,所以要先转换成cDNA。这个可以类比像是视频文件,mp4,rmvb,avi这些都是常见格式,同一个视频不同格式,意思都一样,可以互相转换。

    3.常规PCR反应,加热到94℃把DNA拉链拉开,之后再55℃-60℃让引物,就是拉链扣分别套在两条拉链上,再升温到72℃让拉链自己复制,用左拉链做模板造一个右拉链,用右拉链做模板造一个左拉链。这样折腾一次为一个循环,RNA数量翻一倍。之后再折腾25-30次。这样就算很少量的病毒这个时候也显现出来了。

    荧光定量PCR检测数据

    从接到标本到完成检测共需要五个步骤。一是对送检标本进行登记核对;二是对标本进行水浴灭活;三是完成病毒核酸的提取;四是进行荧光PCR扩增;五是对测试结果分析判断。使用荧光定量pcr仪的时候每个步骤都需要精力高度集中,保证操作万无一失。

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