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常见问题

荧光定量PCR方法进行核酸检测步骤

作者:荧光定量PCR仪   发布时间:2020-05-22

    与新冠病毒肺炎疫情做斗争,如何检测该病毒是诊治防控的重点,而核酸检测作为病原学的依据,越来越被大家所关注。核酸检测原理是什么,核酸检测又有几步?

    核酸检测方法

    核酸检测

    新冠状病毒荧光定量PCR方法的检测原理,就是以病毒独特的基因序列检测靶标,通过PCR扩增,使我们选择这段靶标的DNA序列指数级增加,每一个扩增出来的DNA序列,都可与预先加入的一段荧光标记探针结合,产生荧光信号,而测量累计的荧光信号,就是确定样本中是否存在病毒核酸的依据。

    核酸检测步䠫

    进行核酸检验,需要经过取样、留样、留存、核酸提取、上机检测五个步骤。

    核酸检测的第一步就是采集人体分泌物,用鼻试子或咽试子擦拭鼻腔或咽后壁及双侧咽扁桃体处。

    第二步医务人员进行留样,将试子头浸入细胞保存液中,折断尾部后立即旋紧管盖。

    第三部要将样本放入密闭袋中,保存好并及时送检。

    第四步将样本送进实验室,提取核酸。

    第五步,将提取物进行荧光PCR扩增反应。

    如果样本中有病毒,要进行RT—PCR,即聚合酶链反应,进行基因扩增,看在样本中是否存在病毒RNA,这是目前用的最多的阳性确诊方式。不过,核酸检测为阳性,为确诊病例;为阴性的,也不能完全排除感染,还需要根据临床诊断等表现来判断。

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