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常见问题

荧光原位杂交FISH和荧光探针有什么区别

作者:荧光定量PCR仪   发布时间:2020-05-16

    荧光原位杂交FISH和荧光探针有什么区别?荧光原位杂交技术(FISH):是荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交后,通过荧光显微镜观察(细胞、组织)细胞核彩色探针信号,获得特定DNA靶序列结构和数目异常的信息。

    FISH技术问世于70年代后期,曾多用于染色体异常的研究,近年来随着FISH所应用的探针钟类的不断增多,FISH技术不仅用于细胞遗传学方面,而且还广泛应用于肿瘤学研究。FISH目前的临床应用包括:

    ①染色体数量异常检查:应用于细胞遗传学检查如筛查先天性染色体异常疾病等。

    ②染色体易位检查:应用于肿瘤诊断如白血病、软组织肿瘤等。

    ③基因扩增检查:应用于肿瘤如乳腺癌、肺癌等的靶向药物治疗预测。

    原有的放射性同位素原位杂交技术存在着较多缺点,诸如每次检道验均 需重新标记探针,已标记的探针表现出明显的不稳定性,需要较和时间的曝光时间和对环境的污染等。在观察结果时,需要较多的分裂进行统计学分析。此外,由于放射性银粒和染色体聚集的不同平面,可能引起计数上的误差等。与之比版FISH则具有:

    ①对标本要求相对较低:可用于固定时间合适的石蜡包埋组织。

    ②操作简便,探针标记后较稳定。

    ③方法敏感,能较快得到结果。

    ④在同一标本上,可同时检测几种不同探针。

    ⑤不仅可用于分裂期细胞染色体数量或结构变化的研究,而且还可用于间期细胞的染色体数量及基因改变的研究。

    FISH作为近年来分子病理诊断的新领域,已在国际各大医院开展,国内三甲医院目前仅有数家已开展。经发改委批准,北京积水潭医院病理科于2014年开始正式进行临床FISH检查,目前已开展了应用于Ewing肉瘤诊断的EWSR1的分离探针检查以及应用于滑膜肉瘤诊断的SS18的分离探针检查,已完成检测近20例,检测结果满意。今后还将陆续开展可应用于包括粘液样脂肪肉瘤、骨外粘液样软骨肉瘤、促结缔组织增生性小圆细胞肿瘤、腺泡状横纹肌肉瘤等多种疑难骨与软组织肿瘤的基因检测项目。
    荧光原位杂交FISH和荧光探针有什么区别

    FISH项目的开展提高了诊断的准确率,促进了医院病理诊断水平与世界接轨,为骨肿瘤科、小儿骨科及手外科等科室提供了更准确的诊断信息。

    荧光原位杂交技术问世于70年代后期,其曾多用于染色体异常的研究,近年来随着FISH所应用的探针钟类的不断增多,特别是全Cosmid探针及染色体原位抑制杂交技术的出现,使FISH技术不仅在细胞遗传学方面,而且还广泛应用于肿瘤学研究,如基因诊断基因定位等 。

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