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常见问题

热启动PCR的原理应用优缺点

作者:PCR   发布时间:2021-10-29

    热启动PCR的原理应用优缺点

    1.热启动PCR概述:尽管Taq DNA聚合酶的最佳延伸温度在72℃,聚

    合酶在室温仍然有活性。因此,在进行PCR反应配制过程中,以及在热循环刚开始,保温温度低于退火温度时会产生非特异性的产物。

    热启动就是PCR仪达到变性温度再加入Taq DNA聚合酶,从而抑制一种基本成分延迟DNA合成。

    2.热启动PCR应用:如site-directed突变、表达克隆或用于DNA工程的遗传元件的构建和操作

    3.热启动PCR使用条件:好的引物设计

    4.热启动PCR优缺点:

    ⑴优点:提高PCR特异性最重要

    ⑵缺点:方法十分烦琐,尤其是高通量应用。

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