利用蛋白质重组技术,将Taq DNA 聚合酶与Tth DNA聚合酶进行重组,然后通过定点突变和随机突变技术筛选到。为检测易突变的模板量身定制,尤其是检测病毒类模板(如,HBV、HCV和HIV等检测)。经过重组和筛选,该聚合酶在Mg2+作用即具有逆转录功能,逆转录效率高于Tth,可同时检测DNA和RNA模板。该酶具备5’——3’的DNA聚合酶活性及外切酶活性,适用于TaqMan探针技术。
* 适用于烘干处理的核酸诊断试剂研发及生产 * 适用于常温运输和保存的诊断试剂研发和生产
逆转录酶:Mg2+作用下,具有很强的逆转录活性;逆转录效率不低于野生型MMLV逆转录酶;
延伸效率:>100bp/秒 适用POCT-qPCR量身定制;
检测能力:DNA检测能力0.35拷贝/U,RNA检测能力为2.1拷贝/U;
多重PCR:<5重荧光定量PCR;
Fig 1 1 VirusTest DNA Polymerase 直接扩增 HCV RNA参考品。扩增程序:逆转录:65度2分钟; 扩增检测:95度1分钟;95度5秒,55度10秒,40循环
对引物3’-末端错配不敏感,有利于靶点的检出,尤其适合HIV、HCV及HBV等易变异病毒的检测
Fig 2 等位基因PCR测试VT-Taq SNP检测能力
高温稳定性:液体试剂常温至少可以保存30天以上;
烘干稳定性:聚合酶烘干后,置于37度环境中可以保存25天以上;
冻干稳定性:可耐受高浓度甘露醇、蔗糖、葡萄糖、松三糖和鼠李糖等单糖及多糖赋形剂。Mix 冻干试剂可以维持2年以上;
冻融稳定性:无甘油聚合酶置于-80度及常温,反复冻融10次以上,活性不衰减;
保真性:>105bp, 即聚合105基,才出现一个错配;
Proof-Reading:无3’-5’校正活性,可用于TA克隆;
SNP检测能力:单碱基突变及SNP检测能力比较弱,仅能区分C/C、G/G、T/T等突变;
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